pARE-luc (报告基因质粒)

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碧云天Beyotime
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    基本信息
    产品名称 pARE-luc (报告基因质粒)
    品牌 碧云天Beyotime
    货号 D2112-1μg

          pARE-luc (报告基因质粒)是碧云天自行研发的用于检测基于顺式作用元件antioxidant response element(ARE,抗氧化响应元件)的转录活性水平的报告基因质粒。pARE-luc是以碧云天的pGL6质粒为模板,在其多克隆位点插入了2个ARE结合位点,可以高灵敏度地检测顺式作用元件ARE的激活水平,可以用于检测细胞的抗氧化水平或氧化应激状态。
          pGL6质粒模板是用于在哺乳动物细胞中进行萤火虫萤光素酶(firefly luciferase)报告基因检测的新一代质粒。该报告基因质粒比Promega公司的pGL3系列有了全面的改进,一方面对于luciferase的编码进行了改进,确保能更好地在哺乳动物细胞中进行表达,同时整个质粒中所有可以被预测出的可能的转录因子结合位点全部进行了适当的突变处理,在保持原有功能不变的情况下,使各种转录因子在质粒上的非特异性结合降到最低。
          萤光素、萤光素酶、萤火虫萤光素酶和海肾萤光素酶也经常被称作荧光素、荧光素酶、萤火虫荧光素酶和海肾荧光素酶。
          pARE-luc质粒的主要信息如下:

    Base pairs5622
    ARE response element(ARE RE)32-77
    luc2 reporter gene123-1775
    SV40 late poly(A)signal1810-2031
    SV40 early enhancer/promoter2079-2497
    Synthetic neomycin phosphotransferase
    (Neor)coding region2522-3316
    Synthetic poly(A)signal3341-3389
    Reporter Vector primer 4(RVprimer4)binding region3456-3475
    ColE1-derived plasmid replication origin3713
    Synthetic Beta-lactamase(Ampr)coding region4504-5364
    Synthetic poly(A)signal/transcriptional pause site5469-5622
    Reporter Vector primer 3(RVprimer3)binding region5571-5590

          pARE-luc质粒的图谱如下:

    pARE-luc的多克隆位点及ARE response element的详细图谱见说明书:

    pARE-luc (报告基因质粒).pdf

          pARE-luc中没有的酶切位点(Restriction enzymes that do not cut pARE-luc)包括:

    Aat IIAfl IIAsc IAse IBsa IBsaA IBsiW I
    BspM IIBssH IIEco72 IEcoR IEcoR VMlu INde I
    Nru IPflM IPme IPml IPsp1406 IPspA IRsr II
    Sac ISma ISnaB ISpl ISrf ITth111 IVsp I
    Xcm IXma I

          pARE-luc中的单酶切位点(Restriction enzymes that cut pARE-luc once)包括:

    Sfi IGGCCN,NNN`NGGCC9EcoN ICCTNN`N,NNAGG2997
    Bgl IGCCN,NNN`NGGC9BsiC ITT`CG,AA3392
    Acc65 IG`GTAC,C15BstB ITT`CG,AA3392
    Asp718G`GTAC,C15Sal IG`TCGA,C3406
    Kpn IG,GTAC`C19Afl IIIA`CRYG,T3656
    Nhe IG`CTAG,C21ApaL IG`TGCA,C3970
    PaeR7 IC`TCGA,G27HgiE IIACCNNNNNNGGT -1/134235
    Xho IC`TCGA,G27Not IGC`GGCC,GC4476
    Bgl IIA`GATC,T79BstX ICCAN,NNNN`NTGG4500
    Hind IIIA`AGCT,T89BstE IIG`GTNAC,C4503
    BsrG IT`GTAC,A614Ahd IGACNN,N`NNGTC4578
    Dra IIICAC,NNN`GTG1270Bsu36 ICC`TNA,GG4934
    Gsu ICTGGAG 21/191503Pvu ICG,AT`CG4948
    Bpm ICTGGAG 22/201504Sac IICC,GC`GG4972
    Apo IR`AATT,Y1886Bst1107 IGTA|TAC5088
    Mun IC`AATT,G1950Xca IGTA|TAC5088
    BamH IG`GATC,C2043Spe IA`CTAG,T5407
    Stu IAGG|CCT2476BsmB ICGTCTC 7/115420

          pARE-luc质粒中推荐使用的测序引物序列如下:
          RVprimer3(5571-5590):
          CTA GCA AAA TAG GCT GTC CC
          pARE-luc的全序列信息:

    D2112 pARE-luc-seq.txt


    包装清单:
    产品编号产品名称包装
    D2112pARE-luc (报告基因质粒)1μg
    说明书1份

    保存条件:
         -20℃保存。
    注意事项:
          本质粒未经碧云天书面许可不得用于任何商业用途,也不得移交给订货人所在实验室外的任何个人或单位。
          本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
          为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

    使用说明:
    1. 首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌,进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。抽提获得的质粒可以通过酶切电泳进行鉴定,或通过测序进行鉴定。
    2.pARE-luc可以用常规的细胞转染方法转染细胞。检测时可以采用碧云天的萤火虫萤光素酶报告基因检测试剂盒(

    RG005

    /

    RG006

    )或双萤光素酶报告基因检测试剂盒(

    RG027

    /

    RG028

    )。

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